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生物除油剂初步研究:实验

放大字体  缩小字体发布日期:2012-04-18  浏览次数:569

2.1菌种来源

 

    自然环境中,能够降解石油成分的微生物多达200种以上。其中,假单胞菌属、棒杆菌属、微球菌属和产碱杆菌属中存在许多高效降解石油成分的细菌菌株[2-3]。本试验从各种石油污染的环境中采集菌种样品,作为富集驯化的菌源:(1)以威海槐云路五菱汽车修配厂废机油、汽油、柴油污染的土壤为样品1;(2)以威海东方大众汽配厂受油污污染的土壤为样品2;(3)以威海宇成线业有限公司污水排放口的土壤为样品3;(4)以电镀厂废油污染的土壤为样品4。

 

2.2培养基

 

    牛肉膏蛋白胨培养基用于细菌总数的测定和微生物分离,原油无机盐培养基用于原油降解菌平板数量的测定。原油无机盐培养基(pH=7.2)的成分如下(以质量分数表示):润滑油0.2‰NaCl 0.5‰(NH4)2S040.1%,MgS04·7H20 0.025%,NaN03 0.2%,KH2P040.5%,K2HP04·H20 1.0%,琼脂l.6%。

 

2.3试剂和仪器

 

    所用石油醚等试剂均为市售分析纯。

 

    恒温振荡器,哈尔滨市东联电子技术开发有限公司;pH/温度测试笔,意大利哈钠公司;紫外一可见分光光度计、分析天平和可见分光光度计,上海精密仪器有限公司;离心机,上海安亭科学仪器厂。

 

2.4富集驯化处理

 

各称取1~4号样品200 g,分别加入蒸馏水800 mL,搅拌30 min,静置沉淀,上清液转移到l0 L的玻璃瓶中,从而获得多种来源的混合菌种。然后,加入土壤浸提液1L[1 L水中加入200 g肥沃土壤(提供各种元素),搅拌,沉淀,获得的上清液为土壤浸提液],控制温度在35 ℃、pH 8.5,曝气富集驯化数天。混合液曝气驯化l d后测定残油含量,然后定量补充润滑油、无机磷和无机氮等元素,调整混合液中碳、氮、磷的比例,以利于微生物的生长。富集驯化液中C(即7样机油,为驯化液质量分数的l%)、N[即(NH4)2S04]和 P(即KH2P04)的质量比约为l00:5:1。除油微生物驯化装置如图l所示。

 

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